Ligasi dan Transformasi Gen MSP1 Plasmodium falciparum Penyebab Malaria di Kota Jayapura
Abstract: MSP1 merupakan
protein yang antigenik dan paling banyak diekpresikan pada permukaan merozoit
ketika menginfeksi eritrosit pasien malaria sehingga banyak dikembangkan untuk
desain terapi vaksin. Proses ligasi dan transformasi gen MSP1 merupakan upaya
penggandaan gen untuk menghasilkan produk yang sama ketika diekspresikan.
Penelitian ini bertujuan mengkloning gen MSP1 P. falciparum dari pasien malaria tropika di Jayapura
menggunakan vektor pJET1.2/blunt dan sel kompeten E. coli DH5 sehingga
didapatkan perbanyakan plasmid rekombinan yang mengandung gen MSP1. Darah yang
positif mengandung P. falciparum diproses secara molekuler, diawali tahapan
isolasi DNA genom, amplifikasi dengan teknik PCR, ligasi ke dalam vektor
pJET1.2/blunt dan ditransformasi pada E. coli DH5α dengan metode Heat Shock
Transformation, diakhiri dengan konfirmasi PCR untuk memastikan tersisipkannya
gen blok 2 MSP1. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konfirmasi keberadaan gen
MSP1 dalam pJET1.2/blunt dengan PCR berhasil dilakukan. Dari total 10 koloni
positif yang ditumbuhkan dalam kultur
cair, kemudian diiisolasi plasmid dan dikonfirmasi dengan PCR diperoleh pita
hasil elektroferogram dengan ukuran sekitar 1049 bp yang menunjukan gen MSP1
dalam plasmid. Berdasar atas hasil tersebut, kloning gen MSP1 menggunakan
vektor kloning pJET1.2/blunt dan sel kompeten E. coli DH5a telah berhasil
dilakukan.
Kata kunci: Heat Shock,
ligasi, MSP1, P. falciparum, transformasi
Penulis: Arsyam Mawardi,
Euniche R.P. F. Ramandey
Kode Jurnal: jpkedokterandd170340
