ISOLASI, IDENTIFIKASI, DAN KARAKTERISASI MOLEKULER BAKTERI Aeromonas hydrophila YANG MENGINFEKSI IKAN LELE (Clarias gariepinus)
Abstract: Bakteri Aeromonas
hydrophila merupakan salah satu bakteri patogen yang dapat menginfeksi ikan
lele. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi, mengidentifikasi dan
mengkarakterisasi bakteri yang telah menyebabkan kematian pada ikan lele. Isolasi
bakteri dilakukan pada tiga organ ginjal dan luka ikan lele yang menunjukkan
gejala klinis terserang penyakit A. hydrophila. Identifikasi bakteri
menggunakan uji morfologi dan biokimia. Karakterisasi molekuler bakteri
dilakukan dengan mengamplifikasi gen 16S-rRNA pada bakteri dengan menggunakan
metode PCR. Setelah isolat bakteri didapatkan dilakukan uji pendahuluan untuk
menentukan letal dosis (LD50) dengan metode Injeksi Intra peritoneal. Kepadatan
bakteri yang digunakan pada uji pendahuluan adalah 104-1010 CFU/mL. Pada tahap
berikutnya dilakukan uji tantang dengan bakteri A. hydrophila. Selama uji
tantang berlangsung, dilakukan konfirmasi ulang dengan cara mengisolasi bakteri
dari ikan yang mati dan hampir mati. Pada hari ketujuh uji tantang, bakteri diisolasi
dari organ hati, limpa dan ginjal ikan yang masih hidup. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa sebanyak 56 (87,5%) isolat murni bakteri A. hydrophila telah
berhasil diisolasi dari ginjal dan luka ikan lele yang menunjukkan gejala
klinis. Hasil identifikasi morfologi dan biokimia menunjukkan bahwa
masing-masing isolat mempunyai kemiripan dengan bakteri A. hydrophila berkisar
99,53-99,64%. Hasil Karakterisasi molekuler 16S-rRNA, isolat AG1, AG2 dan AL56
mempunyai kemiripan yang sama dengan A. hydrophila (99%). Tingkat patogen
bakteri A. hydrophila ditemukan pada LD50 1,2 x 105 CFU/mL, LD50 2,9 x 106
CFU/mL dan LD50 3,08 x 108 CFU/mL mulai dari 24 jam sampai hari ke tujuh. Hasil
uji tantang menunjukkan bahwa kematian tertinggi d”50% pada jam ke 72. Bakteri
A. hydrophila tidak berhasil ditemukan pada organ hati dan limpa, tetapi
ditemukan pada ginjal ikan yang masih hidup.
Keywords: isolasi;
identifikasi; karakterisasi; Clarias gariepinus; A. hydrophila
Penulis: Huria Marnis, Bambang
Iswanto
Kode Jurnal: jpperikanandd150618
