EFEKTIVITAS TRANSFER GEN HORMON PERTUMBUHAN IKAN MAS PADA EMBRIO WILD BETTA, Betta imbellis
Abstract: Metode transfer gen
yang sesuai untuk ikan betta belum diketahui. Sebagai tahap awal pembuatan ikan
betta Betta imbellis transgenik,
dilakukan penelitian untuk menentukan perbandingan volume transfektan
dan DNA vektor ekspresi yang menghasilkan banyak ikan betta transgenik. Vektor
ekspresi yang digunakan mengandung gen GH dari ikan mas (CcGH) yang dikontrol
oleh promoter beta-aktin (CcBA) dari ikan mas.
Embrio ikan Betta imbellis yang diperoleh dari hasil pemijahan alami
dikoleksi 1-2 menit setelah memijah.
Transfeksi dilakukan dengan menggunakan media larutan X-treme Gene dengan
konsentrasi 0,25 µL: 0,25 µL DNA gen GH (perlakuan A) dan X-treme Gene dengan
konsentrasi 0,75 µL : 0,25 µL DNA gen GH (perlakuan B); kontrol positif (tanpa
plasmid DNA) (perlakuan C); serta kontrol negatif (tanpa plasmid dan tanpa
larutan transfeksi) (perlakuan D), masing-masing ulangan lima kali. Jumlah embrio setiap ulangan perlakuan adalah
100 butir dalam 2 mL larutan transfektan.
Embrio hasil transfeksi ditetaskan dalam wadah berisi 1 liter air. Hasil analisis PCR menunjukkan bahwa gen GH
telah berhasil diintroduksi ke embrio ikan Betta imbellis. Derajat penetasan untuk semua perlakuan
termasuk kontrol positif dan kontrol negatiflebih dari 80%.Jumlah ikan yang
membawa gen GH ikan mas berdasarkan analisis PCR adalah 16% untuk konsentrasi
transfast 25 µL dan 13% untuk konsentrasi transfast 75 µL.
Keywords: transfer gen; hormon
pertumbuhan; Betta imbellis; transfeksi
Penulis: Eni Kusrini, Erma
Primanita Hayuningtyas, Ruby Vidia Kusumah, Sawung Cindelaras
Kode Jurnal: jpperikanandd160326
