EFEKTIVITAS TRANSFER DAN ANALISIS EKSPRESI GEN IMUNOGENIK TAHAN KOI HERPES VIRUS (KHV) PADA IKAN MAS (Cyprinus carpio)
Abstract: Penelitian transfer
gen imunogenik tahan KHV (krt-GP11) pada ikan mas telah dilakukan dengan metode
elektroporasi sperma menggunakan konsentrasi DNA yang berbeda. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui konsentrasi DNA optimal yang efektif digunakan dalam
transfer gen pada ikan mas. Sperma dielektroporasi menggunakan tipe kejutan
square wave dengan voltase 50 V dan jumlah kejutan tiga kali. Konsentrasi DNA
yang digunakan adalah 10 μg/mL, 50 μg/mL, dan 100 μg/mL. Deteksi transgen pada
sperma, embrio, dan larva dilakukan dengan metode PCR menggunakan primer
spesifik untuk gen krt-GP11. Ekspresi transgen pada embrio dan larva dianalisis
secara semi-kuantitatif dengan metode reverse transcriptase PCR (RT-PCR). Hasil
penelitian menunjukkan bahwa gen krt-GP11 terdeteksi pada sperma, embrio, dan
larva. Pemberian konsentrasi DNA 10 μg/mL lebih efektif digunakan dalam
transfer gen krt-GP11 pada ikan mas, sedangkan peningkatan konsentrasi DNA yang
digunakan tidak memberikan hasil yang berbeda terhadap keberhasilan transfer
gen pada ikan mas. Ekspresi gen krt-GP11 yang berhasil diintroduksikan pada
ikan mas baru dapat teramati dengan baik pada fase embrio.
Keywords: ikan mas; KHV;
elektroporasi; konsentrasi DNA; transfer gen; ekspresi gen
Penulis: Khairul Syahputra,
Didik Ariyanto, Erma Primanita Hayuningtyas, Lamanto Lamanto
Kode Jurnal: jpperikanandd140403
