KARAKTERISASI ENZIM ORGANOFOSFAT HIDROLASE DARI Pseudomonas putida PADA SUBSTRAT DIAZINON DAN MALATHION
ABSTRAK: Organofosfat hidolase
(OPH) merupakan enzim intraseluler yang diisolasi dari bakteri Pseudomonas
putida. Enzim ini mampu mendegradasi pestisida golongan organofosfat. Enzim OPH
yang telah diisolasi dari Pseudomonas putida, dimurnikan dengan metode fraksinasi
bertingkat menggunakan amonium sulfat dengan tingkat kejenuhan0-45% dan 45-65%.
Uji aktivitas enzim dilakukan dengan mereaksikan OPH dengan substrat diazinon
maupun malathion pada berbagai konsentrasi dan pH, pada temperatur ruang selama
30 menit. Penentuan pH optimum OPH dilakukan dengan mengukur aktivitas enzim
pada variasi pH (7,5; 8; 8,5; 9; 9,5). Penentuan parameter kinetika reaksi
enzimatis (Vmaks dan KM) dilakukan dengan mereaksikan enzim OPH pada variasi
konsentrasi diazinon (6; 8; 10; 15; 20) ppm dan malathion (10; 15; 20; 25; 30)
ppm. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi pengendapan 0-45% mempunyai
aktivitas optimum 0,035 unit untuk diazinon dan 0,067 unit untuk malathion. pH
optimum yang dicapai berdasarkan aktivitas tertinggi untuk diazinon pH 9 dan
malathion pH 7,5. Hasil penentuan kinetika reaksi enzimatis OPH didapatkan
Vmaks = 3,5 x10-3µmol/menit dan KM = 7,4 mg/L untuk diazinon, sedangkan untuk
malathion Vmaks = 16,8 x 10-3 µmol/menit dan KM = 19,24 mg/L.
Penulis: Anik Sri Wijaya,
Sasangka Prasetyawan, Anna Roosdiana
Kode Jurnal: jpkimiadd140084
