KARAKTERISASI ENZIM ORGANOFOSFAT HIDROLASE (OPH) DARI PSEUDOMONAS PUTIDA PADA SUBSTRAT KLORPIRIFOS DAN PROFENOFOS
Abstract: Organofosfat
hidrolase (OPH) merupakan enzim intraseluler yang diperoleh dengan cara isolasi
dari bakteri Pseudomonas putida. Enzim ini mampu mendegradasi pestisida
golongan organofosfat. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui kemampuan
enzim OPH dalam mendegradasi pestisida golongan organofosfat klorpirifos dan
profenofos, serta mengetahui kondisi kerja optimum dan kinetika kimia reaksi
enzimastisnya. Enzim OPH dimurnikan melalui fraksinasi bertingkat menggunakan
ammonium sulfat dengan fraksi pengendapan 0-45% dan 45%-65%. Uji aktivitas
enzim OPH dilakukan dengan mereaksikan enzim dan substrat profenofos dan
klorpirifos pada pH optimumnya. Kinetika reaksi enzimatis enzim OPH dengan
substrat klorpirifos dan profenofos ditentukan dengan cara mereaksikan enzim
OPH dengan substrat profenofos dan klorpirifos dengan variasi konsentrasi 2-10
ppm, kemudian ditentukan Vmaks dan KM. Hasil penelitian menunjukkan aktivitas
enzim spesifik untuk substrat klorpirifos adalah 0,017 unit sedangkan untuk
substrat profenofos 0,024 unit. pH optimum OPH untuk substrat klorpirifos yaitu
pH 7,5 sedangkan pH optimum untuk substrat profenofos yaitu pH 8,5. Parameter
kinetika reaksi enzimatis enzim OPH untuk substrat klorpirifos Vmax= 1,34 x
10-3 µg. mL-1. menit-1, KM = 2,17 mg/L dan profenofos Vmax = 1,87 x 10-3 µg.
mL-1. menit-1, KM =3,08 mg/L. Hasil analisa dengan menggunakan pola rancangan
acak lengkap (RAL) menunjukkan bahwa perlakuan pH berpengaruh nyata terhadap
aktivitas OPH (p<0,05).
Penulis: Kartika Kusuma
Wardani, Sasangka Prasetyawan, Chanif Mahdi
Kode Jurnal: jpkimiadd140083
