PRODUKSI ANTIBODI POLIKLONAL SEBAGAI BAHAN PENDETEKSI EKSPRESI PROTEIN DARI VIRAL NERVOUS NECROSIS (VNN) PADA IKAN KERAPU
Abstract: Antibodi poliklonal
anti VNN pada kelinci dibuat sebagai antibodi pengikat (capture) antigen VNN
dengan tujuan untuk mendeteksi ekspresi protein virus VNN yang menginfeksi ikan
kerapu. Filtrat virus VNN dari ikan kerapu dipergunakan sebagai antigen
diemulsikan dengan Freund’s adjuvant complete untuk imunisasi kelinci dengan
rute subcutan (dosis 33,5 µg/kg bobot badan). Ulangan sebanyak 2 kali
mengunakan dosis yang sama diemulsi dengan Freund’s adjuvant incomplete dalam
interval waktu 2-3 minggu. Konfirmasi uji terbentuknya antibodi poliklonal anti
VNN pada kelinci dilakukan dengan metode AGPT. Sedangkan metode ELISA dan
Western blotting digunakan untuk mengukur dan mendeteksi spesifitas antibodi
poliklonal terhadap antigen VNN dalam pengujian vaksin DNA VNN pada ikan
kerapu. Hasil menunjukkan bahwa serum kelinci bereaksi positif membentuk
antibodi terhadap VNN setelah 1-2 minggu pasca imunisasi ketiga. Garis
presipitasi tampak jelas pada pengujian agar gel presipitation test/AGPT. Hasil
analisa ELISA antibodi poliklonal anti VNN dari kelinci terhadap ikan yang
divaksin DNA VNN menunjukkan reaksi positif (nilai rasio S/P) lebih tinggi
dibandingkan ikan yang tidak divaksin. Hal ini mengindikasikan antibodi
poliklonal merespons antigen VNN dengan sangat baik. Konjugat yang berlabel
enzim mampu berinteraksi dengan antibodi anti VNN asal kelinci yang terikat
pada antigen VNN. Hasil analisa imunokimia dengan Western blot menunjukkan
reaksi positif setelah difusikan dengan protein pengikat dari antibodi
poliklonal anti VNN dari kelinci. Reaksi positif menunjukkan bahwa antibodi
poliklonal anti VNN dari kelinci mengandung protein yang homolog dengan sampel
ikan yang divaksin DNA VNN ditunjukkan adanya pita pada daerah 42 kDa. Dari
hasil penelitian menunjukkan bahwa Antibodi poliklonal anti VNN yang diproduksi
pada kelinci berpotensi digunakan sebagai bahan pendeteksi ekspresi protein
virus VNN yang menginfeksi ikan kerapu serta mengukur induksi kekebalan ikan
kerapu terhadap infeksi VNN
Keywords: antibodi poliklonal;
ekspresi protein; Virus Nervous Necrosis (VNN)
Penulis: Wiwien Mukti
Andriyani, Sri Murtini, Alimuddin
Kode Jurnal: jpperikanandd150666
